HomeРазноеВолосатый огурец: D0 b2 d0 be d0 bb d0 be d1 81 d0 b0 d1 82 d1 8b d0 b9 d0 be d0 b3 d1 83 d1 80 d0 b5 d1 86 картинки, стоковые фото D0 b2 d0 be d0 bb d0 be d1 81 d0 b0 d1 82 d1 8b d0 b9 d0 be d0 b3 d1 83 d1 80 d0 b5 d1 86

Волосатый огурец: D0 b2 d0 be d0 bb d0 be d1 81 d0 b0 d1 82 d1 8b d0 b9 d0 be d0 b3 d1 83 d1 80 d0 b5 d1 86 картинки, стоковые фото D0 b2 d0 be d0 bb d0 be d1 81 d0 b0 d1 82 d1 8b d0 b9 d0 be d0 b3 d1 83 d1 80 d0 b5 d1 86

Содержание

Мал, да удал! Популярные сорта огурцов – корнишонов | Родные сотки

Соленые огурчики, наверное, самая популярная закрутка на нашей необъятной Родине. Особенно хорошо на столе выглядят маленькие хрустящие огурчики «на один зубок».

Корнишоны (до 8см), а также их меньшие братья – пикули (до 4см), по сути, это огурцы, снятые до полного созревания. Некоторые хозяйки обходятся простыми сортами огурцов и срывают огурчики маленькими, но часто такие корнишоны лишены нужной сочности, запаха, да и полезных веществ «нагулять» не успели. Да и обрывать у молодого растения только наливающиеся плоды, рука как-то не поднимается…

Да и не нужно это. Давно выведены отличные сорта корнишонов, которые обильно плодоносят небольшими огурчиками с отменными пищевыми качествами и прекрасно подходят как под засолку, так и на салат. Чем больше и чаще собираешь, тем больше в итоге получаешь. Для употребления в пищу уже хороши огурчики размером 3-4 см, вырастают в среднем до 8-10 максимум, качеств не теряют.

«Народные» сорта огурчиков-корнишонов

Филиппок

Среднеспелый (50дней) гибрид для открытого грунта. Обильный урожай, огурцы не перерастают, устойчив к болезням. Очень популярный и доступный сорт.

Любимый зятек

Раннеспелый (40дней) самоопыляемый гибрид, который можно выращивать даже на подоконнике. Очень урожайный (до 25 кг с 1 кв.м).

Парижский корнишон

Один самых вкусных огурчиков-гибридов. Раннеспелый, опыляемый, подходит как для теплиц, так и для открытого грунта. Не нуждается в прощупывании. Огурчики длиной 5-8см, хорошей формы с бугорками.

Дружная семейка

Известный многим неприхотливый урожайный гибрид. Плоды красивые, ровные, один к одному. Среднеранний, тепличный. Могут вырасти до 12 см.

Сладкий хруст

Гибрид необычной расцветки. Масса плодов 60-70 г. Огурчики вкусные, необычные, из-за расцветки их сложно пропустить на грядке)

Также многие рекомендуют такие сорта:

«Настя F1», «Скатерть-самобранка», «Детский F1», «Барабулька F1», «Примадонна F1», «Веселая компания F1», «Кураж F1», «Домовой F1», «Сын полка F1», «Мотылек F1», «Моравский».

Если вам понравилась заметка, ставьте «понравилось» и подписывайтесь, что в ленте Дзен появлялось больше интересных материалов о садоводстве и домашнем хозяйстве.

ВОЛОСАТЫЕ ОГУРЦЫ И ПОЛОСАТЫЕ БАКЛАЖАНЫ – ЭТО ВКУСНО!

 

Для садоводов —
тружеников

Но сразу предупреждаем: такой сказочный огород не для любителей гамака и газонной травы. Пахать здесь надо и только пахать! Что и делает с превеликим удовольствием Юлий Альбертович.

– Два года назад у нас тыква уродилась весом аж 34 килограмма! Двое мужчин еле-еле затащили эту «богатыршу» в машину, – делится доктор Бунов. – Долго вы ко мне ехали, половина урожая уже собрана, поэтому будем овощи в ведрах фотографировать.
Большинство названий лично я слышала впервые, поэтому по участку передвигалась, едва успевая записывать. Итак, все по порядку…

Циклантера

Продолговатые плоды длиной три сантиметра. Вкус – смесь огурца, болгарского перца и зеленого горошка. В жареном и тушеном виде циклантера похожа на спаржевую фасоль, а вот по микроэлементному составу превосходит огурцы.

Мелотрия

Из семейства тыквенных, завезена к нам из тропической Африки. Плоды напоминают маленькие огурчики. Вкус тонкий, но с кислинкой, так как кожица содержит органические кислоты. Плоды едят свежими, солят и маринуют.

Портулак

Родом из Западной Индии. Нежные сочные листочки с освежающим кисловатым вкусом. Добавляют в сыром виде в салаты, но в республиках Закавказья их предпочитают мариновать.

Крукнек

Близкий родственник тыквы родом из Центральной Америки. По питательной ценности превосходит кабачки, патиссоны и многие сорта тыквы за счет более высокого содержания сахаров, каротиноидов, солей кальция и магния. В диетическом питании крукнек используют при сердечно-сосудистых заболеваниях, болезнях почек и желудочно-кишечного тракта.

Мускатная тыква

Почему японцы долго живут? Потому что они очень любят мускатную тыкву. И доктор Бунов сажает ее каждый год. Этот овощ отличается высоким содержанием каротина и минеральных солей. Кроме Японии, мускатную тыкву выращивают в южных штатах США, Китае и Италии.

волосистый — это… Что такое волосистый?

  • ВОЛОСИСТЫЙ — ВОЛОСИСТЫЙ, волосистая, волосистое (минер.). Имеющий волокнистое строение, в отличие от сплошного. Волосистый азбест. Толковый словарь Ушакова. Д.Н. Ушаков. 1935 1940 …   Толковый словарь Ушакова

  • волосистый — прил. , кол во синонимов: 3 • велес (5) • волосастый (6) • волосатый (25) Словарь синон …   Словарь синонимов

  • Волосистый лесной муравей — ? Волосистый лесной муравей …   Википедия

  • волосистый пирит — — [http://slovarionline.ru/anglo russkiy slovar neftegazovoy promyishlennosti/] Тематики нефтегазовая промышленность EN capillary pyrites …   Справочник технического переводчика

  • Волосистый — I прил. разг. Покрытый, обросший волосами; волосатый. II прил. разг. Покрытый волосками [волосок I]. III прил. разг. Имеющий волокнистое строение. Толковый словарь Ефремовой. Т. Ф. Ефремова. 2000 …   Современный толковый словарь русского языка Ефремовой

  • волосистый — волосистый, волосистая, волосистое, волосистые, волосистого, волосистой, волосистого, волосистых, волосистому, волосистой, волосистому, волосистым, волосистый, волосистую, волосистое, волосистые, волосистого, волосистую, волосистое, волосистых,… …   Формы слов

  • волосистый — волос истый …   Русский орфографический словарь

  • волосистый — …   Орфографический словарь русского языка

  • волосистый — ая, ое; сист, а, о. 1. Разг. = Волосатый. 2. Спец. Покрытый волосами. В ая часть головы. 3. Ботан. Покрытый волосками (3 зн.). В ые листья. В. огурец. 4. Геол. Имеющий волокнистое строение. В. асбест. В. колчедан …   Энциклопедический словарь

  • волосистый — ая, ое; си/ст, а, о. 1) разг. = волосатый 2) спец. Покрытый волосами. В ая часть головы. 3) ботан. покрытый волосками 3) В ые листья. Волоси/стый огурец. 4) геол. Имеющий волокнистое строение. Волоси/стый асбест …   Словарь многих выражений

  • волосистый — волос/ист/ый …   Морфемно-орфографический словарь

  • Настоящая бразильская кухня: Машиши или антильский огурец

    Машиши (maxixe) — плоды травянистого тропического растения, родственного тыкве. На вкус машиши похож на огурец, слегка приправленный уксусным соусом. Во многих странах он известен под названием «антильский огурец». Машиши даже и пахнет как свежие огурцы, а вот внешне совсем на них не похож.

    Покрытый пупырышками, а иногда и слегка «волосатый» овощ в Бразилии прозвали «гусиная кожа». Что и говори, выглядит необычно, с первого взгляда не поймешь овощ это или фрукт. Только когда очистишь от кожицы, видишь перед собой самый натуральный огурец — светло-зеленый, влажный от сока и с мягкими косточками.

    Машиши можно есть свежим, добавлять в салаты или тушить.  В арабских странах эти овощи фаршируют. Лично мне кажется, что тушить машиши и вообще подвергать его тепловой обработке — только портить. Но это исключительно моё имхо. В Бразилии не очень хорошо с огурцами (любят переращивать), так что для меня свеженькие машиши были просто находкой.

    Ещё один аргумент в пользу того, чтобы есть машиши свежими это то, что в этих овощах содержится огромное количество цинка, который теряется при жарке и варке. Цинка нам часто не хватает и восполнить его недостаток естественным путём не так-то просто. Ещё свежий машиши укрепляет мужское здоровье, способствует улучшению обмена веществ, понижает уровень холестерина в крови и даже устраняет белые пятнышки на ногтях.

    Служит источником кальция, железа, натрия, магния, витамина С, витаминов группы В и провитамина А.

    Очень полезны соки из машиши в сочетании с другими овощами и фруктами: с яблоком, с яблоком и морковью,  с яблоком и сельдереем, с апельсином. Они способствуют очищению и оздоровлению организма.

    Для тех, кто болеет диабетом, рекомендуется пить сок из машиши, смешанный с водой. Готовится он просто: разрежьте дольками один машиши, добавьте стакан воды и взбейте в блендере. Такой сок нужно пить натощак и через 30 минут после ужина.

    Вот такой замечательный этот машиши!

    Читать «Старые обиды и предательство (СИ)» — Пачесюк Максим Григорьевич — Страница 11

    — Тогда иди, — разрешил перевертыш. – Мы сразу за тобой. Если он нападет – стреляем.

    — Он нападет, — уверенно ответил Саймон. – Но вы не стреляйте. Молния не нанесет мне большого вреда. Просто дайте мне пару минут и не вмешивайтесь.

    — Тут извини, — не согласился брат. – Я не могу позволить гостю пострадать.

    — Давай сойдемся на том, что ты не позволишь мне умереть, а немного пострадать я всегда готов. У тебя свадьба скоро, так я в любом случае буду страдать похмельем, — пошутил Саймон, но в голосе слышалась затаенная надежда.

    — Разрешите ему, — неожиданно вступилась Финелла. – Это действительно может помочь.

    Мы переглянулись с Логаном и молча пришли к согласию.

    — Иди. Мы вмешаемся, когда сочтем нужным. Девушки, как насчет пикника здесь? Немного гарью тянет, зато шоу понаблюдаем.

    Девушки согласились и быстро расстелили одеяла.

    Саймон собрался с мыслями, настроился, привык к ощущениям и направился прямиком к элементалю, который обычным зрением все еще был невидим. К слову, это только Дженни мешало. Но уже после четвертого шага баронета в его направлении, элементаль встрепенулся и ощетинился короткими электрическими разрядами. Элементали земли часто принимают человекобразную или зверооподобную форму, а элементаль молнии был похож на летающий волосатый огурец.

    Он не ходил, не летал, перемещался быстрыми рывками. Волоски молнии вытягивались в сторону движения и тут же сокращались, подтягивая невидимое тело. Занимало это доли мгновений.

    — Не стрелять! – взмолился Саймон, когда огурец рванул к нему. Девять рывков заняли секунды две, и он оказался рядом. Сверкнула молния, Кеттл сел на задницу, а элементаля отбросило к столбу. – Не стрелять, — повторил баронет и достал из кармана мелочь.

    Взяв монетку, он запустил ее в элементаля, подкрепив молнией. Этому фокусу он научился в казематах вампиров, только там расстояния были куда меньше, металл позволял протянуть молнию к телам врагов, а на холме они почему-то срывались через полметра, хотя монеты и долетали.

    Огурец наблюдал за потугами Саймона с минуту, а потом стрельнул в него толстой длинной молнией. Баронет снова сел на задницу, на этот раз с прожженным в районе груди пальто.

    — Не стрелять! – прикрикнул он, счастливо сбивая с груди огонь. Тут же вскочил и попер на элементаля. – Ну же, братец, удиви меня! Давай!

    Сверкнула еще одна молния, пальто снова загорелось, но Саймон устоял и даже попытался ответить. Его рука окуталась искрами, которые тут же с треском исчезли. Элементаль выстрелил снова, Кеттл сбил огонь и выдал бесполезные искры.

    Мы с Логаном снова переглянулись, спрятали оружие и вернулись к девушкам, которые уже достали яйца, запеченные в фарше, говядину в булке и термос с глинтвейном. Наблюдать за потугами Саймона стало веселее, хотя они с огурцом и не двигались. Просто элементаль безнаказанно портил баронету одежду. Мы расслабились и позволили пару шуток на этот счет.

    Примерно через полчаса Кеттл неожиданно выдал молнию, что кривой дугой прошлась по земле и потухла, так и не достав элементаля. Мы захлопали в ладоши, а огурец, перестал торчать на месте, взбесился и налетел на Саймона. Тот успел выдать еще одну молнию, и даже попал, когда расстояние между ними сократилось до полутора метра, но на этот раз элементаль проигнорировал атаку и сбил баронета с ног, придавил к земле и впился в него всеми волоскакми-разрядами, которые засверкали как бенгальский огонь в ночи.

    Мы с Логаном сорвались с места, в считанные секунды оказались рядом и выстрелили. Кристаллическая картечь порвала элементаля, как ветер рвет дым. С земляных хоть трофеи остаются, а этот просто развеялся. Надо будет с Гарри обсудить, может есть способ что-то выжать.

    — Живой? – спросил я Саймона. Его тушка немного дымила.

    — Живее всех живых! – заявил баронет и бодренько вскочил на ноги. Его волосы торчали во все стороны, как иголки ежика, а на лице была улыбка полного психа. Он повернулся к громоотводу, вытянул в его сторону руку и выдал молнию, что уткнулась в землю метрах в трех, так и не достав столба. – Да! – победно вскричал он.

    — Молодец, — похвалил его Логан. – Иди в одеяло закутайся, пока не простудился. Девушки, займитесь.

    Мы же с братцем собрали полные накопители и разложили пустые. Пару деревянных столбиков пришлось обновить, но это не заняло много времени. После чего я, Финелла и Саймон занялись медитацией. У каждого были свои причины для этого. Я, например, заливал до краев пустоту в роднике стихий. Не самое приятное ощущение, особенно с такой колючей стихией, словно ежик в мочевом пузыре поселился, но я сжал зубы и терпел. Терпел, пока заливал, терпел, пока ждал конца медитации Финеллы, пока выгонял Саймона, он уходить не хотел, пока шли к машинам и ехали домой. Я так побледнел от боли, что друзья переживать начали. И ради чего? К вечеру магия убежала из родника, не оставив и следа.

    Глава 6

    Сначала я думал, что вызов на совет был связан с моими Фарнельскими делами. А дел я там натворил… не всякому соклану расскажешь. Больше всего склонялся к мысли о деньгах. Им прибыли мало? Если старичье потребует повлиять на Гарри в плане цен на эктоплазму и накопители, я сдержусь, но если спросят о вампирах или не дай бог всплывет что-то о Саймоне, том что Ферон…

    Тогда мысль показалась невероятной, и я отогнал ее подальше. А за полчаса до назначенного срока обнаружил на рабочем столе выдранный из дневника лист. Красивым почерком под датой восемнадцатого мая одна тысяча девятьсот тридцать шестого, было написано:

    «Август заказал залетного неодаренного. Предложил две штуки, но я выбил три и, такое впечатление, что он с радостью дал бы больше. Надо быть осторожнее. Что-то не так с этим делом.»

    И буквально же сразу запись следующего дня. Дня первой встречи с Саймоном Фероном в Фарнелле.

    «Это был чертов Кинкейд! Дункан Кинкейд! Как, мать его дери, этот мелкий ублюдок все время умудряется портить мне жизнь? Я замел все следы, он просто не мог меня отыскать, но факт налицо. Тем более, что эта скотина так и заявила. Он пришел за мной! Каким-то образом разнюхал о природе друзей, которые помогли мне снять печать, но конкретных имен не знает.

    А вот сам работает с кровососом Линдеманном. Если бы не сучка Кейт, я бы его грохнул. Август явно недоплатил! Но ничего, я стрясу с него причитающееся, да и друзья мои будут рады знать о еще одном Кинкейде.

    Следующая запись без даты была о Гарри с краткой характеристикой «чокнутого Кувалды». Тянулась она к середине обратной страницы листа, после чего переключалась на Финеллу Флауэр.

    Подделка или настоящая страница из дневника Саймона? Неужели он вел его, даже покинув клан? Дневники велись для того, чтобы передать мудрость поколений, чтобы предостеречь от ошибок и оставить след в истории. Бреморцы гибли. Мы были хорошими бойцами и охотниками, но не бессмертными. Часто перед серьезными операциями дневники оставляли в условно безопасных местах. Но Саймон ушел из клана, связался с кровососами… Хотя по тексту так не скажешь! «Друзья»! Чтоб его…

    И кто кому жизнь портить умудряется? То призраком вернулся, то дневник этот всплывает!

    Я ощутил, что состояние мое очень близко к паническому. Хорошо, что девушки забрали Кеттла новое пальто покупать, и я в доме остался сам. А то мог бы и его сгоряча поспрашивать, что это такое и откуда оно тут взялось. Баронет ведь тоже с вампирами связан был, только с другим гнездом. Вспомнив это, я немного поостыл и стал размышлять здраво.

    Кому Ферон оставил свой след? Кто мог зайти в мой дом и оставить этот лист прямо на рабочем столе деда?! Вампир, которого ознакомили с нашей системой безопасности, или кто-то из клана? Родня Ферона? Его отец был главным конкурентом дяди на выборах нового главы.

    До приемов у деКампа в городской ратуши Фарнелла, большому совету клана было далеко, но в свете вновь открывшихся фактов я трижды переодевался, чтобы удержаться на грани человека приличного, но далеко не франта. Раньше я о таких вещах не парился, а тут ведь по-любому оценивать будут. Да и вообще теперь непонятно, зачем меня звали! Это нервировало. В голову всякая фигня лезла.

    Эти незнакомые… огурцы — Экологический дайджест FacePla.net

    Создано 17.07.2012 15:58
    Автор: IndigoMan

    Их выращивали египтяне, греки и римляне. О них знала средневековая Европа. Их крошит в оливье каждая современная хозяйка. И кажется, будто мы знаем об огурцах всё — но селекция продолжает «колдовать» над хрустящим овощем, а садоводы и дачники всё активнее интересуются семенами экзотических лиан, ведь некоторые заморские родичи тыквы вполне могут прижиться и у нас. Давайте знакомиться: 6 непривычных «огурцов» со всего света!

    Огурцы сорта «Соль с перцем» (Salt and Pepper)

    Агрономы Джейсон Каваторта и Молли Ян из Корнелльского университета (Cornell University, New York) из самого обычного огурца вывели новый деликатесный сорт, чьи вкусовые качества гурманы единодушно оценили на «пять с плюсом».

    Странное название «овощной шедевр» получил за свой внешний облик: кожура не зелёная, а практически белая, как соль. К тому же, огурец покрыт чёрными точками, которые напоминают молотый чёрный перец. Преимущества нового сорта — неприхотливость в агротехнике, устойчивость к мучнистой росе и некоторым другим вредителям.

    Огурец-лимон, или «Хрустальное яблоко» (Crystal apple)

    Когда эти странные округлые огурцы созревают, то цветом и формой становятся похожи на лимоны. Однако на вкус это обыкновенные огурцы — хрустящие, сладкие и душистые, идеально подходящие для консервирования. С каждого растения, плодоносящего до заморозок, можно собрать до 10 кг развесёлых «лимонов». Семена есть в продаже в магазинах Западной Европы или доступны через интернет – к счастью, сорт не является гибридом, и потому на следующий год у садовода уже будет собственный запас семян.

    Антильский огурец – Кивано (Cucumis metulifer)

    Другие названия новозеландского огурца — рогатая дыня, ангурия. Жёлто-оранжевый плод с многочисленными «рожками» прозвали дыней за приятный и освежающий вкус зелёной мякоти, в котором сочетаются нотки банана, огурца и лимона.

    Красивые плоды используют в кулинарии, медицине и даже для декорирования помещений – от растительных композиций до ёлочных украшений.

    Красный огурец — Тладианта (Thladiantha dubia)

    5-6 сантиметровые «огурцы», а по сути лишь продолговатые тыковки, на вкус напоминающие огурцы с мёдом, используют в салатах, гарнирах и джемах. Растение очень неприхотливо – его можно выращивать на балконах или крытых лоджиях.

    А ещё можно скрещивать красный огурец с дыней, тыквой и обыкновенными огурцами, чтобы получить забавные гибриды непривычного цвета.

    Африканский мини-огурец — Мелотрия (Melothria scabra)

    Мелотрия шершавая – многолетняя лиана родом из тропических лесов экваториальной Африки. Маленькие зелёные плоды с хорошо выраженным мраморным рисунком по вкусу напоминают огурцы, которые можно есть свежими или консервировать.

    Кроме плодов растение образует клубни весом до 400 грамм, напоминающие клубни батата – их используют в салатах. Выращивать мелотрию в средней полосе можно – но зимой клубни замерзают, поэтому в наших условиях приходится выращивать малюток как однолетник, т.е. через рассаду.

    Индийский огурец – Момордика (Momordica charantia)

    Изображение этой диковинки знакомо всем – благодаря стилизованным принтам на текстиле, в типографии и т.д. Восточную лиану семейства тыквенных ещё называют бешеной дыней или бальзамной грушей. Удлинённая ягода ярко-оранжевого цвета, покрытая пупырышками, заключает в себе красные семена, по вкусу напоминающие спелую хурму. Сама «обёртка» близка к вкусу вызревшей тыквы с горчинкой.

    Хитрое растение само подсказывает, когда пора собирать урожай: пока семена полностью не поспеют, все части лианы жгутся, как крапива. Строптивую красавицу можно выращивать в теплицах, на балконе и даже на подоконнике – почему бы не сделать свой интерьер вкусным?

    Волосатый огурец, Бари | Блокнот для огорода

    Этот чудесный пушистый огурчик был одним из самых любимых растений на моем огороде этим летом. Небольшой пухлый светло-зеленый плод с пушистой или «пушистой» кожицей и сладковатой хрустящей мякотью. Естественная привычка растений — ползти, но их можно привязать к лазательному каркасу. Быстрый урожай, примерно через 60 дней, они также являются плодовитыми, и кажется, что чем больше их собирают, тем больше огурцов производят растения.Самое главное, что они абсолютно вкусные и не горчат даже в сильную сухую жару. Я не думаю, что еда прошла, так как они начали собирать урожай в начале июня, без них. Огурцы Бари на самом деле имеют гладкую кожуру, мех просто стирается.

    Кейт из Hills & Plains & Seedsavers в Австралии привезла семена прошлой осенью во время своего визита во Францию ​​и доверила мне некоторые из этих красивых реликвий. Кейт приехала с семенами, потому что семья Радонья из Бари, которая выращивала этот огурец в Италии под названием Caroselli Baresi, привезла семена с собой в Австралию.Один из членов семьи, Сильвио, который выращивал их более 30 лет в Австралии, передал часть семян Кейт, потому что хотел убедиться, что семена будут продолжать расти, а огурцы будут выращивать другие садоводы. Прочтите историю Кейт о ее встрече с Сильвио и его огурцами

    .

    Меня настолько впечатлили эти семейные реликвии, что я начал проводить некоторые исследования, чтобы узнать о них больше, и обнаружил целое семейство, о котором я не знал, итальянский тип карозелло, небольшой плод с ворсистой кожицей и хрустящей мякотью, выращенный и едят как огурец, но ботанически как дыню, Cucumis Melo .Если эти огурцы Бари относятся к итальянскому типу кароселло, Cucumis Melo , то у меня есть небольшая проблема с моим планом экономии семян в этом году, потому что дыни легко скрещиваются. Я планировал сохранить семена этих огурцов Бари не в последнюю очередь потому, что пообещал Кейт, поэтому я посадил в горшке только один огурец, Бари, полагая, что это Cucumis Sativus , но я также посадил в горшке дыни. , поэтому, если бари — это дыня, они могут пересечься. Дыни еще не зацвели, так что у меня есть время выдернуть их, чтобы убедиться, что Бари не пересекается с ними. Я бы с радостью пожертвовал дынями ради этих маленьких красавиц. Я посадил Армянский огурец в политоннеле, который называется Cucumis Melo , поэтому я могу только надеяться, что барьер политоннеля сократит шансы пересечения достаточно, чтобы не подвергать опасности семена Бари. Если кто-нибудь может подтвердить, к какому ботаническому семейству принадлежат эти огурцы Бари, я был бы очень признателен.

    Цветочный мохнатый огурец (Бари)

    Мех просто стирается в руках или под краном.

    Оставлено для выращивания на семена

    По мере того, как они растут и становятся крупнее, характеристики становятся более похожими на дыню, мякоть, хотя и не сладкая, имеет более дынный вкус, мех становится тоньше или, возможно, такое же количество меха распределяется по большей площади.

    Исследования
    Исследовательская статья Опубликованная статья о разновидностях огуречных дынь, которые все еще растут в Южной Италии. Есть ряд «огурцов» из Южной Италии и, в частности, из Апулии, которые кажутся похожими в том, что у них яростная кожа и они маленькие.

    Я нашел похожие огуречные дыни в ряде источников семян следующим образом.
    Огурец Barese от Grow Italian Описывается как: светло-зеленый овальный огурец/дыня от Bari. Белая плоть. 4 дюйма в длину. Мягкий вкус и очень урожайный. 70 или около того дней. Типичная «пушистая» кожа этого типа.

    Огурец  Carosello Barese от Садовая реликвия Огурец Barese Seeds из Бари производит светло-зеленый овальный огурец типа дыни с белой мякотью, мягким вкусом и очень урожайным.

    Carosello Barese от Gourmet Seeds Описывается как: чрезвычайно вкусная и очень мягкая семейная реликвия. Текстура и вкус очень приятные. Похож на огурцы мандурианские круглые. У него нет колючек, как у обычного огурца, но легкий персиковый пушок, так как он действительно принадлежит к семейству дынь, без горечи или «отрыжки». Собранные молодые (как показано на фото), нарежьте и используйте целиком, как огурцы. Если позволить ему расти, он начнет ребриться и у него появится тонкая кожица, а вкус изменится на слегка сладкий дынный.Замечательный «огурец», бестселлер, хит любого стола и отличная новинка на рынке.

    Carosello Mezzo Lungo и другие армянские огурцы, кароселло и маринованные дыни от Solan Seeds

    Исходное сообщение от Mas du Diable  8 августа 2009 г. обновлено в июле 2012 г.

    Нравится:

    Нравится Загрузка…

    Родственные

    Вниз на участке: мой мохнатый огурец!

    В 20:50, Распределение Мэла сказало…

    Это какой-то ланчбокс, Матрона!

    В 21:48, Дамо сказал…

    Они прекрасно выглядят Матрона.

    В 22:48, Банчик и Какда сказали. ..

    Интересно, как огурцы бывают в разной одежде… Мех однозначно необычный.Тот, который я недавно вырастил, пришел голым…… Надеюсь, что с вашего особого растения вырастет еще много огурцов… ~bangchik

    В 2:21, Калена Мишель сказала…

    Красивые пирожные! Постараюсь приобрести эти огурцы на следующий год.

    В 12:21, тина сказала…

    Очень классный огурец! Я думаю, что это красиво, и мягкий вкус является бонусом.Как здорово вырастить такую ​​аккуратненькую штучку.

    Я просматривал все твои овощи и ежевику. Ух ты! Они выглядят потрясающе. Лягушка слишком милая. P.S. Да! Талледега считает:)

    В 13:53, Мой сад чатни сказал…

    Вау. Пушистый огурец. Это очень круто!! Спасибо, что поделился. Интересно, будет ли он расти в тропиках?

    В 16:50, Анонимус сказал…

    Еще один вид Cucumis melo — «армянский огурец», также известный как змеиная дыня или змеиная дыня. Он никогда не пушистый, но при этом имеет нежную кожицу и очень приятный «огурец».

    В 22:24, Пегги сказала…

    Привет, Матрона, ты всегда придумываешь что-то необычное для своего сада! Мохнатые огурцы для меня в новинку, наши обычные или огородные в этом году почему-то провалились, поэтому пытаться выращивать что-то хоть немного экзотическое нельзя.У вас отличный урожай в предыдущем посте.

    В 4:17 утра, Аноним сказал…

    Пришел полюбоваться вашей продукцией, мохнатые огурцы просто великолепны… с тех пор, как умер мой муж, я больше не «Сад Энни 24 х 24» (сад был для него, чтобы наслаждаться из окна), я теперь «Теанна и барон…начнем сначала». Я счастлив, что «гном возвращается домой». какое прекрасное кругосветное путешествие он совершил.Теанна, она же Энни

    В 13:51, Неизвестный сказал…

    Какой другой вид после смывания меха! Что-то я не видел раньше. Огурец — один из моих любимых овощей.

    В 12:47, Кэрри сказала…

    О, это новинка для меня. Я видел их с шипами, но без меха — это должно быть какой-то модный огурец в штанах, хотя я надеюсь, что они носят только искусственный мех — хахаха (я смеюсь, и это все, что имеет значение *краснеет*)

    В 16:21, — сказала Эмма…

    Это особенное 🙂

    В 2:22, Томас сказал…

    Как интересно! Очищенная кожа выглядит очень тонкой и нежной. Побольше бы таких тортов.

    В 1:43, «Зеленый мир» Лу Мюррея сказал…

    Привет Матрона.Привет из Южной Калифорнии, США. Я был бы заинтересован в получении семян этого огурца, если вы занимаетесь экономией семян. Недавно я присоединился к Seed Savers Exchange и был бы счастлив разнести этот огурец здесь, в штатах. Я бы не хотел, чтобы он вымер.

    В 7:06 утра, Матрена сказала…

    Лу — это важно, чтобы это продолжалось. Это мой единственный огурец в этом году.У меня есть несколько крошечных пушистых наростов на другом растении, но я еще не знаю, дойдет ли это до чего-нибудь. Обязательно предложу семена, если получу.

    В 16:20, Лора сказала…

    Привет, матрона
    Рад, что вам понравились сорта Bari Cucs
    Просто отметим, что если вы хотите, чтобы растения давали больше урожая, их нужно собрать до того, как они начнут набухать, если вы понимаете, о чем я. Очевидно, для сохранения семян им необходимо оставить до полного созревания.Куки набухают намного больше и выпадают волосы, когда они полностью созревают, и становятся более сладкими на вкус, больше похожими на дыню. Я разместил страницу об этом cuc в своем блоге www.masdudiable.com

    В 22:20, Аноним сказал…

    Всем привет! У кого-нибудь есть семена пушистых огурцов, которые они хотели бы обменять на какие-то другие семена? (цветы, овощи и многое другое… у меня есть все виды) Большое спасибо! 😀 Таня www.valle-maggia.ch

    В 22:13, Джей сказал…

    Похоже на Mezzo Lungo di Polignano из Бари. Очень вкусный сорт огурцов! Я выращиваю эти и многие другие сорта огурцов-дынь и кароселло. В моем климате они часто менее восприимчивы к болезням. Я люблю их есть, потому что они всегда без горечи и без отрыжки.

    шипов на огурцах — удаление колючек огурцов из колючих огурцов

    В этом году сосед подарил мне немного огурцов.Она получила их от подруги подруги, пока никто не догадывался, какого они сорта. Несмотря на то, что у меня много лет был огород, я никогда не выращивал огурцы. Действительно! Так что я швырнул их в саду и сюрприз! Они хищно выращивали колючие огурцы. Ну, я никогда не видел шипов на огурцах, так как я обычно получаю эти гладкие, готовые к употреблению пирожные из продуктового магазина. Так почему же мои огурцы стали колючими, а колючие огурцы нормальными? Давайте исследовать.

    Почему мои огурцы становятся колючими?

    Огурцы относятся к семейству тыквенных вместе с кабачками, тыквами и дынями.Их делят на две группы: засолочные и нарезные сорта. Оба сорта могут иметь разную степень колючести огурца, поэтому колючие огурцы на самом деле вполне нормальны. У некоторых могут быть крошечные волоски, а у других сплошные шипы. Сорта для нарезки обычно менее колючие, а сорта для маринования более колючие.

    Родом из Индии, огурцы, возможно, стали колючими по той же причине, по которой некоторые животные маскируются или имеют рога… чтобы защитить себя от хищников. Это, несомненно, относится к огурцам.

    Выращивайте огурцы на полном солнце в хорошо дренированной почве, в которую добавлено большое количество компоста. Посейте семена внутри или подождите и посейте прямо снаружи, когда температура почвы прогреется как минимум до 60 градусов по Фаренгейту (15 градусов по Цельсию) и минует всякая опасность заморозков. Огурцы хорошо растут при температуре 70 градусов по Фаренгейту (21°С) днем ​​и выше 60° по Фаренгейту (15°С) ночью.

    Если вы высеваете семена в помещении, посадите их за две-четыре недели до даты последних заморозков в вашем регионе в беспочвенной среде.Перед пересадкой обязательно закалите рассаду.

    Располагайте растения на расстоянии от 12 до 24 дюймов (31–61 см) друг от друга рядами на расстоянии 5–6 футов (1,5–2 м) друг от друга для нарезки оладий. Для засолки огурцов расстояние между рядами составляет от 8 до 12 дюймов (20–31 см) на расстоянии от 3 до 6 футов (1–2 м) друг от друга. При прямом посеве поместите по два-три семени на горку, а затем проредите самые слабые. Обильно и регулярно поливайте и удобряйте.

    Если вы выращиваете вьющийся сорт огурца, обязательно обеспечьте какую-либо поддержку.

    Можно ли есть колючие огурцы?

    Колючки на огурцах не смертельны, но есть их будет ужасно неудобно. Хорошей новостью является то, что вы всегда можете очистить огурец, если огуречные колючки находятся на большой стороне.

    Самый колючий плод огурца — это именно то, что покрыто мелкими волосатыми колючками. Для них хорошая стирка, вероятно, удалит колючки. Если они не отходят сразу, используйте щетку для овощей, чтобы удалить их.

    О, и это интересно.Я только что прочитал, что нетронутые, гладкие пирожные, которые мы привыкли покупать в супермаркете, имеют шипы. Они удаляются перед продажей потребителю! Кто знал? Также следует отметить, что некоторые сорта сегодня выведены бесхребетными.

    Большой мохнатый огурец — Ферма Хиллсайд-Спрингс

    Мы настолько местные, насколько это вообще возможно, здесь, на нашей маленькой овощной ферме. У нас есть три акра продукции в Нью-Гемпшире, которую мы продаем членам сообщества, поддерживающим сельское хозяйство, из близлежащих городов в Нью-Гэмпшире и Вермонте, а также людям, часто посещающим фермерский рынок Кин.У нас есть несколько семейных сортов овощей Нью-Гэмпшира, которые растут вместе со всеми нашими другими культурами, и у нас есть команда лошадей, родившихся и выращенных в Нью-Гэмпшире.

    Мы, два фермера, тоже практически местные, хотя один из нас вырос за пределами Филадельфии, а другой на молочной ферме в северной части штата Нью-Йорк. В конце концов, в наш первый сезон в составе Granite Staters, еще в 2002 году, мы получили высокий комплимент: нас окрестили «не флатландцами». Например, «Полагаю, вы все-таки не флатландец», — замечание, сделанное нашим соседом семидесяти с лишним лет, который всю свою жизнь прожил в Нью-Гэмпшире.

    Одна из замечательных особенностей местного населения, конечно же, заключается в том, что оно дает фермеру устойчивое и безопасное место для прополки моркови, капусты или капусты и, таким образом, для местного существования. Однако, чтобы мы не стали слишком локальными (или даже — ох! — провинциальными), мы всегда можем рассчитывать на всех замечательных людей, которым нравится наша продукция, чтобы сделать нас глобальными.

    Например, наш член CSA из Австралии, который однажды, когда мы посетили сад, сказал: «О-о-о, это серебристая свекла?»

    Я колебался, пытаясь вызвать в себе образ знающего местного фермера.

    Наконец-то я ответил. — Ммм, — сказал я со знанием дела. «Теперь, о каком из этих овощей вы могли бы говорить?»

    Участник рассмеялся и указал на швейцарский мангольд.

    «О, да!» Я сказал: «Силва, свекла! У нас много свеклы сильва!» говоря это так же, как и она, в своей крутой австралийской манере. Затем мы перешли к стручковому перцу, горячему, стручковому перцу, сладкому, и стручковому перцу, зеленому (это был бы перец). Следующим был кабачок, который то ли похож, то ли идентичен кабачкам, я никогда не был в этом уверен.

    В очередной раз мы имели удовольствие, что отец и его взрослая дочь, родом из Кореи, собирали горох в нашем саду. Отец жадно набивал свой мешок горохом; дочь все говорила: «Вот, попробуй вот это», — и собирала сахарный горох с соседнего ряда.

    Отец покачал головой. «Посмотрите на эти снежные горошки!»

    «Они действительно хороши, папа», — повторила дочь. «Попробуйте эти.»

    Отец немного вздохнул и взял сахарную горошину.Он жевал его. — А, — сказал он дочери. «Почему мы не знаем их?»

    Он улыбнулся. Она улыбнулась. Он перешел к ряду сахарного гороха.

    Кроме того, мой коллега-фермер всегда в курсе интересных семян из других стран, либо через каталоги семян, либо через путешествия людей. Один участник приносит нам капусту и тыквенные семечки, когда посещает свою родную Бельгию. Португальский друг приносит нам семена капусты, португальский помидор и большую длинную штуку, похожую на кабачок, чтобы вырастить.Мы попробовали священный базилик от друга из Индии и эстонский помидор от семьи другого члена из этой страны.

    Только в этом году мой приятель нашел в каталоге пушистый бледно-зеленый итальянский огурец. Он растет в форме футбольного мяча, и через день мы проверяли, готов ли он к сбору.

    «Готово? Мы выбираем его?» Я бы спросил.

    Мой знающий местный фермер пожал плечами. «Я не знаю. Он становится довольно большим. Да! Давайте выберем!»

    Мы выбрали его, а потом посмотрели.Он точно был волосатым и забавной формы. Тогда моему приятелю пришла в голову блестящая идея спросить одного из наших новых членов об огурце. «Он итальянец! Его зовут Доменико! Он узнает, готово ли оно!» сказал мой товарищ.

    — Он может знать, — с сомнением сказал я. «Это не очень похоже на огурец».

    И вот сладкий конец истории: мой товарищ показывает огурец Доминику (Доменико!) «О, о!» — восклицает он. — Я не видел ни одного из них уже тридцать лет! Мой отец выращивал их в Италии!

    Той ночью мы получаем электронное письмо с фотографией ужина Доменико: помидоры семейной реликвии и итальянский салат из огурцов.«Грейзи! Это не может быть лучше, чем это!» говорится в сообщении.

    Мы, местные фермеры, полностью согласны с этим.

    Первоначально опубликовано в Monadnock Shopper News , 30 сентября — 6 октября 2015 г.

    Выращивание пушистых дынь дома

    Волосатая тыква называется по-китайски чи-квам, моа-куа, моа-гуа, а также известна как волосатая дыня, волосатый огурец, пушистая тыква, пушистая тыква, китайская консервирующая дыня или маленькая зимняя дыня .

    В Соединенных Штатах его также называют восковой тыквой или пепельной тыквой, и в настоящее время он очень популярен благодаря своей огромной пользе для здоровья и пищеварительной помощи. Вырастить эту экзотическую тыкву дома несложно. Это руководство научит вас, как это сделать.

    Мы также поделимся с вами всем, что вам нужно знать о пользе волосатой тыквы для здоровья.

    Несмотря на большое количество недавних новостей, есть несколько фактов, которые многие люди не знают об этом овоще из Юго-Восточной Азии.

    Мы развеем для вас мифы и расскажем, как вырастить пушистую дыню в домашних условиях.

    Что такое волосатая тыква?

    Несмотря на то, что люди во всем мире называют Benincasa hispida по-разному, все они относятся к висячей лозе, которая дает плоды небольшого или среднего размера. Тыквы могут быть круглыми или продолговатыми и обычно светло-зеленого цвета. Спелые тыквы будут иметь тонкий беловатый пушок на кожуре, отсюда и многочисленные названия.

    Как бы вы ни называли волосатую тыкву, ее польза для здоровья хорошо документирована и научно доказана.Они использовались традиционными практиками восточной медицины в течение сотен лет. Различные аспекты здоровья волосатой тыквы недавно стали популярными в США среди потребителей, страдающих проблемами пищеварения.

    Волосатая тыква также низкокалорийна, что делает ее желанной альтернативой для людей, которые ищут диетические варианты с низким содержанием углеводов.

    Как вырастить мохнатую тыкву

    Несмотря на названия, связанные с зимней тематикой, мохнатая тыква — это летняя тыква, которая хорошо растет в жарких условиях .Поскольку это висячий сорт, садовникам нужно будет предусмотреть достаточно места для его длинных лоз. В Индии и других частях Азии тыкву обычно выращивают под шпалерой, которая позволяет развивающимся плодам висеть. Это предотвращает повреждение от земли и может увеличить урожайность, сохраняя при этом контроль над длинными лозами.

    Проращивание семян мохнатой тыквы

    Волосатая тыква лучше всего растет из семян. Садоводы могут посеять семена в помещении за две-три недели до последних заморозков.Волосатые тыквы лучше всего растут при температуре почвы выше 65 градусов по Фаренгейту, поэтому использование теплицы или нагревательного мата для прорастания поможет увеличить скорость прорастания. Посадите прорастающие семена в плодородную, хорошо дренированную горшечную почву и обеспечьте удобрением молодые растения для достижения наилучших результатов.

    Выращивание мохнатой тыквы в вашем саду

    Волосатая тыква производит длинные лозы, которые стелются по земле. Виноградные лозы могут достигать нескольких футов в длину, если оставить их расти без присмотра. Волосатые лозы тыквы не будут легко карабкаться по конструкциям, поэтому низкая решетка, на которую садовник может драпировать растущие лозы, поможет предотвратить бесконтрольный рост растения.Это также облегчает сбор плодов.

    Волосатая дыня предпочитает нейтральную почву и нуждается в периодических удобрениях фосфатом, калием и азотом. Песчаная почва может потребовать внесения удобрений несколько раз в течение вегетационного периода, чтобы обеспечить здоровый рост растений и сильное плодоношение.

    Требования к поливу для мохнатой тыквы просты. Растения предпочитают хорошо дренированную почву и никогда не должны выращиваться во влажной почве. Еженедельный полив — это все, что требуется, за исключением самых жарких условий.Избегайте чрезмерного полива волосатых растений дыни, чтобы снизить вероятность бактериальных и грибковых инфекций.

    Сбор волосатых тыкв

    Обычно через 30-40 дней после посадки на стелющихся лозах появляются крупные желтые цветы. Для развития плода требуется от пяти до восьми недель. Незрелые волосатые тыквы будут темнее по цвету и покрыты белым пушком по всей коже. Когда плод созреет, пушок станет похож на пепел. Это означает, что тыква готова к сбору урожая.

    Многие люди предпочитают собирать незрелые тыквы, когда они немного больше мяча для софтбола. Плод тыквы на этом этапе напоминает огурец и будет иметь слегка горьковатый привкус. По мере созревания плода горький вкус может усиливаться.

    Вредители и болезни, общие для растений волосистой тыквы

    Растения волосистой тыквы восприимчивы к многочисленным вредителям и болезням . Как правило, любые вредители или болезни, поражающие дыни, кабачки, огурцы или тыквы, также являются фактором риска для садоводов, выращивающих мохнатые тыквы.В некоторых случаях раннее обнаружение проблемы может помочь вам вылечить растение, пока не стало слишком поздно.

    Насекомые

    Наиболее распространенными насекомыми, поражающими растения мохнатой тыквы , являются огуречные жуки и тля. Жуки, как правило, едят листья и цветы, а тля высасывает сок из растений и лоз. Другие распространенные вредители включают паутинных клещей, клопов и листоверток. Нематоды в почве также могут создавать проблемы, когда популяция выходит из-под контроля.

    Болезни

    Чрезмерная влажность, как правило, приводит к большинству болезней растений волосатой тыквы .

    Ложная мучнистая роса является распространенным заболеванием, встречающимся на многих участках выращивания мохнатых дынь. Ложная мучнистая роса чаще всего возникает на влажных участках, когда вода скапливается на листьях. Также распространены пятнистость листьев и широкий спектр фитофтороза.

    Лечение зараженных растений мохнатой тыквы

    Лучшее средство для лечения тыквы мохнатой – это профилактика . Большинство распространенных проблем возникает из-за плохого состояния почвы, в том числе из-за слишком большого количества воды и недостаточного дренажа. Вода, которая застаивается на листьях и стеблях, часто вызывает проблемы.

    У садоводов, которые используют капельное орошение и тщательно следят за поливом, мало вредителей и болезней.

    Когда насекомые атакуют растения мохнатой тыквы, есть несколько коммерческих инсектицидов, которые могут быть полезны. Самодельная смесь масла нима, воды и средства для мытья посуды может быть эффективной при лечении тли, паутинного клеща и других насекомых.

    Предотвращение чрезмерного полива — лучший способ остановить грибковые и бактериальные инфекции.

    К сожалению, как только симптомы заражения станут видны, скорее всего, уже слишком поздно спасать растение.Лучше всего осторожно удалить зараженное растение, чтобы предотвратить перенос спор на другие растения. Почву нужно будет обрабатывать, чтобы предотвратить рецидив грибковых и бактериальных недугов.

    Волосатая тыква в восточной медицине

    На протяжении нескольких столетий волосатая тыква использовалась в традиционной восточной и аюрведической медицине для лечения широкого спектра заболеваний. Говорят, что приготовленная мякоть волосатой тыквы улучшает пищеварительную функцию, помогает уменьшить симптомы астмы и других проблем с легкими и часто используется для лечения ленточных червей.Волосатая дыня используется в качестве мочегонного средства для естественного выведения токсинов из организма.

    Тыкву обычно очищают от кожуры, затем нарезают соломкой или нарезают соломкой, а затем обжаривают в воке с сушеными креветками и рисовой лапшой. Из-за мягкого вкуса волосатую тыкву обычно готовят из соленых ароматных ингредиентов, которые дополняют тыкву. В нем много клетчатки и мало калорий и углеводов, поэтому это отличный ингредиент для людей, которые стараются есть меньше.

    Научные доказательства пользы волосатой тыквы для здоровья

    Научные испытания доказали, что, по крайней мере, некоторые из заявленных преимуществ волосатой тыквы для здоровья действительно существуют.

    Прежде всего, исследователи установили, что благодаря использованию экстрактов волосатой тыквы можно получить многочисленные преимущества для пищеварения.

    1. Язвы

    Было показано, что тыква мохнатая уменьшает развитие язв у крыс. Считается, что противомикробные свойства волосатой тыквы уменьшают рост бактерий, вызывающих язвы.

    2. Воспаление

    Экстракты волосистой тыквы доказали свою эффективность в уменьшении воспаления, основной причины многих хронических заболеваний.Антимикробные свойства волосатой тыквы, скорее всего, ответственны за уменьшение воспаления.

    3. Сахарный диабет 2 типа

    Высокое содержание клетчатки и низкое содержание углеводов в волосатой тыкве может снизить риск развития диабета 2 типа. Было показано, что волосатая тыква снижает уровень сахара в крови и снижает уровень инсулина у мышей, но исследования на людях не продемонстрировали четкого эффекта.

    Заключение

    • Волосатая тыква известна во всем мире под многими именами.
    • Волосатые тыквы веками использовались в народной медицине.
    • Современная наука подтвердила некоторые заявленные преимущества.
    • Волосатую тыкву можно выращивать практически на любом типе почвы.
    • Многочисленные вредители и болезни могут повлиять на рост растений и плодов мохнатой тыквы.
    • Чрезмерный полив является наиболее распространенной причиной проблем с мохнатой тыквой.

    Волосатая тыква имеет почти столько же преимуществ для здоровья, как и ее название, и это также очень легкое растение для выращивания в вашем саду.Часто используют шпалеру, чтобы плоды не лежали на земле, так как мохнатая тыква плохо лазает.

    Мохнатая тыква — отличный вариант для садоводов, которым нужен универсальный и полезный вариант. Его диетические преимущества значительны. С появлением кето-диет и других вариантов с низким содержанием углеводов популярность волосатой тыквы возрастает.

    Если вам нужна помощь в уходе за садом, вы обратились по адресу! Мы любим садоводство и хотим поделиться этой любовью с вами.Присоединяйтесь к нашему динамичному садовому сообществу.

    Последние сообщения от Evergreen Seeds (посмотреть все)

    Bur Cucumber, Sicyos angulatus L.

    Старейший общественный сад диких цветов в США

    Общее название
    Огурец бурый (Огурец односемянный, Огурец звездчатый

     

    Научное название
    Sicyos angulatus L.

     

    Семейство растений
    Тыква (тыквенные)

    Расположение в саду
    Северный луг за задними воротами

     

    Основной сезон
    С начала лета до осени

     

     

    Бур Огурец – местная однолетняя вьющаяся лиана с угловатыми опушенными ветвящимися стеблями и ветвящимися усиками.Стебли вьются или стелются, расползаясь по ландшафту и близлежащим растениям. Стебли опушенные, обычно с железистыми волосками. Напротив некоторых листовых узлов встречаются либо ветвящиеся усики, либо соцветия. Усики разветвляются 3-4 раза и закручиваются в одном направлении, а затем в обратном направлении.

    Листья широкие, почти круглые, до 8 дюймов в длину и ширину, с 3-5 неглубокими лопастями (обычно 5), конечная лопасть обычно дельтовидная; нижние 2 доли могут быть довольно мелкими.Главная жилка идет к кончику каждой доли и образует точку, за исключением двух базальных долей, где вены расходятся. Края листьев гладкие, за исключением равномерно расположенных крошечных заостренных железок. На нижней стороне листа есть тонкие волосы, особенно на жилках, а на верхней поверхности могут быть короткие грубые волосы. Стебли толстые и опушенные.

    Соцветие: Бур Огурец однодомный, то есть с разделенными полами на растении. Тычиночные цветки (мужские) встречаются в кистевидных соцветиях на длинном стебле от 10 до 21, а пестичные (женские) — в шаровидных соцветиях от 8 до 16, обычно из одного и того же листового узла, но на более коротком стебле.

    Цветы имеют 5 чашелистиков и 5 лепестков. Гипантий чашевидной формы. Чашелистики очень маленькие, в основном дельтовидной формы и частично рефлекторно отгибаются при раскрытии цветков. Лепестки на части длины сросшиеся, затем несколько треугольные с железисто-волосистым верхом. Тычиночные цветки имеют очень маленький венчик — 4 — 5 мм, белый до зеленовато-белого цвета, зеленый преимущественно по жилкам, с тычинками, соединенными в один столбик, образующими булавовидную массу наверху и выступающими.Пестичные цветки того же цвета с 1 столбиком, который неясно трехлопастный. Они находятся в тесном скоплении на коротком стебле, каждая цветочная завязь заключена в колючий плод.

    Семя: Цветы созревают в структуру семейства тыквенных, известную как «пепо», которая представляет собой крупную ягоду с жесткой внешней кожицей. Каждый цветок может дать один pepo, но они встречаются группами, расходящимися наружу от центральной точки, точно так же, как пестичные цветы, но обычно только от 3 до 10 сформировали семена.Скопление часто выглядит звездообразно, отсюда и альтернативное общее название. Отдельные бобы имеют яйцевидную форму, содержат одно семя, имеют носик с остатками столбика и с острыми тонкими игольчатыми шипами на поверхности.

     

    Место обитания: Бур Огурец вырастает из неглубокого ветвящегося стержневого корня на влажных плодородных участках, где нет проточной или стоячей воды и особенно на нарушенной почве. Он образует большие коврики, как показано на фото ниже, и регенерирует из семян.

    Названия: Род Sicyos по-гречески означает огурец. Название вида angulatus означает «угловатый» и относится к структуре семян и грозди семян. Авторское название растений по классификации — ‘L.’ относится к Карлу Линнею (1707-1778), шведскому ботанику и разработчику биномиальной номенклатуры современной систематики.

    Сравнения: Два растения в нашей области имеют листья и характеристики роста, подобные огурцу Bur.Дикий огурец Echinocystis lobata имеет такие же листья, но с более глубокими пазухами. Его плод не твердый и четырехкамерный. Canada Moonseed, Menispermum canadense , имеет похожий лист, но с гладкой поверхностью, черешок прикрепляется к нижней стороне листа, а края гладкие. Цветы и плоды совершенно разные.

    См. внизу страницы заметки об истории посадки Сада, распространении в Миннесоте и Северной Америке, знаниях и других ссылках.

    Вверху: Бур Огурец образует ковер из листьев, стеблей и усиков, карабкаясь по растениям и предметам. Рисунок Бриттона Н.Л. и А. Брауна. 1913. Иллюстрированная флора северных Соединенных Штатов, Канады и британских владений. 3 тома. Сыновья Чарльза Скрибнера, Нью-Йорк.

    Внизу: 1-е фото — гроздь женских цветков с одним открытым. 2-е фото — пучок мужских цветков, каждый из которых имеет или будет иметь длинный опушенный стебель по сравнению с плотным скоплением женских цветков.Обратите внимание на загнутые маленькие чашелистики.

    Внизу: 1-е фото — женские цветки с открытым стилем. 2 фото — мужские цветки.

    Внизу: Два листа — обратите внимание на различия в базальных пазухах.

    Внизу: 1-е фото — Мелкие, равномерно расположенные заостренные железки вдоль края листа. 2 фото — стебли имеют угловатые гребни и сочетание тонких и длинных беловатых волосков.

    Внизу: Группа пепо в форме звезды с игольчатыми шипами.Отдельные пепо — это затвердевшие ягодообразные плоды семейства тыквенных.

    Внизу: Пример большого коврика, который может образовывать этот вид.

    Примечания:

    Примечания: Бур-огурец не был зарегистрирован в саду полевых цветов Элоизы Батлер, но его можно найти сразу за северной стороной сада на северном лугу. Он не распространен в Миннесоте и известен только в 20 округах, большинство из которых находится в южной части штата, включая многие округа с пригородами.В Северной Америке он встречается в Онтарио и Квебеке в Канаде и в штатах США от Северной Дакоты и Техаса на восток. В отличие от обычного, этот вид был завезен в Европу как декоративный, а теперь стал инвазивным сорняком.

    Четыре вида Sicyos встречаются в Северной Америке, только S. angulatus встречаются в Миннесоте.

    Справочники и ссылки на сайты

    Ссылки: Характеристики станции, как правило, взяты из источников 1A, 32, W2, W3, W7 и W8, а также из других источников, если они применяются конкретно.Распространение в основном из W1, W2 и 28C. История посадки обычно с 1, 4 и 4а. Другие источники по конкретной ссылке. Подробности см. в справочном списке.

    Идентификационный буклет для большинства цветущих трав и небольших цветущих кустарников в саду полевых цветов Элоизы Батлер. Подробности здесь.



    Friends of the Wild Flower Garden, Inc. Текст и фотографии принадлежат Г. Д. Бебо, если не указано иное. «www.friendsofthewildflowergarden.org»

    границ | Эффективная волосистая корневая система для проверки активности вектора трансформации растений и CRISPR/Cas Construct в огурце (Cucumis sativus L.)

    Введение

    Родом из Индийского субконтинента, огурец ( Cucumis sativus L.) стал одним из наиболее потребляемых овощей, широко выращиваемых в мире (Paris et al., 2012; Taha et al., 2020). Однако в настоящее время выращивание огурцов страдает от биотических и абиотических стрессов (Liu et al., 2013; Chojak-Koźniewska et al., 2018; Fan et al., 2020; Taha et al., 2020). Существуют различные подходы, используемые для улучшения производства огурцов, такие как оптимизация условий выращивания (Taha et al., 2020), прививка растений (Elsheery et al., 2020) и селекция. Из них современная селекция с помощью генной инженерии известна как наиболее эффективный метод, поскольку генетическая изменчивость сортов огурца составляет 3–8% (Чи, 2001; Пладер и др., 2007). Редактирование генома, усиленное системами CRISPR/Cas, широко применялось к различным сельскохозяйственным культурам в качестве мощного инструмента для улучшения свойств растений и изучения функций генов (Zhang et al., 2021). Было несколько сообщений об использовании CRISPR/Cas9 для целенаправленного нокаута гена у огурца (Chandrasekaran et al., 2016; Ху и др., 2017). Тем не менее, применение редактирования генома у огурца сталкивается с проблемами из-за менее эффективных процедур трансформации, которые требуют много времени и трудоемкости (Hu et al., 2017). Следовательно, для ускорения генной инженерии огурца необходимы усовершенствование процедур и разработка вспомогательных инструментов.

    Rhizobium rhizogenes -опосредованные культуры волосистых корней были созданы и разработаны у различных видов растений для получения биомассы, производства рекомбинантного белка, изучения функций генов и исследований вторичных метаболитов (Gutierrez-Valdes et al., 2020). Кроме того, в некоторых отчетах волосатые корни также могли использоваться в качестве материала для создания целых растений (Trulson et al., 1986; Bueno dos Reis et al., 2007; Butler et al., 2020; Zhang et al., 2020). В последнее время трансформация волосатых корней широко используется для проверки и оптимизации индуцированного мутагенеза с помощью системы CRISPR/Cas9 (Michno et al., 2015; Du et al., 2016; Jacobs and Martin, 2016; Li et al., 2019; Ле и др., 2020). И in vitro , и in vivo культуры волосистых корней огурца были созданы для различных исследовательских целей (Shi and Lindemann, 2006; Anuar et al., 2011; Фан и др., 2020). Однако о применении трансформации волосатого корня огурца для редактирования генома с использованием систем CRISPR/Cas пока не сообщалось. Более того, сообщалось, что на частоту индукции волосяных корней влияют сорта огурцов, бактериальные штаммы и методы трансформации (JingLong et al., 2017; Fan et al., 2020).

    В этом исследовании для местного сорта огурца была разработана эффективная процедура индукции и трансформации волосистых корней огурца in vitro .Эту систему также применяли для экспрессии репортерного гена ( gus ), а также для проверки активности конструкции CRISPR/Cas. Целевые мутации, включая гетерозиготные, гомозиготные и биаллельные индели в двух целевых генах CsbHLH66 и CsbHLH82 , были получены в первичных и размноженных трансгенных волосатых корнях. Эти результаты представляют собой эффективный инструмент для изучения экспрессии генов, функций генов и редактирования генома у огурца.

    Материалы и методы

    Растительный материал

    Семена местного огурца ( Cucumis sativus L.) сорта Choka F1 стерилизовали поверхность в 15% коммерческом отбеливателе (отбеливающий раствор, содержащий 5% гипохлорита натрия, Duc Giang, VN) в течение 15 мин, затем промывали 4–5 раз в стерильной воде (Hoang et al., 2021). Простерилизованные семена замачивали в автоклавной воде на 3 часа при 26°С. После удаления семенных оболочек нераненые семена помещали на среду MS30 (табл. 1) на 2 сутки в темноте.

    Таблица 1 . Перечень сред, используемых при трансформации волосатого корня огурца.

    Конструкция вектора CRISPR/Cas9 для анализа волосатых корней

    Последовательности CsbHLH66 и CsbHLH82 и других родственных белков были обнаружены BlastP (NCBI) с использованием последовательности белка Lotus japonicus ROOTHAIRLESS1 (LjRHL1) (Karas et al., 2009) в качестве ссылки. Чтобы вызвать целевые мутации в генах CsbHLH66 и CsbHLH82 , гРНК были созданы с помощью программы CCTop (Stemmer et al., 2015). Векторы трансформации растений CRISPR/Cas9 были сконструированы на основе вектора pKSE401 (адгенная плазмида № 62202), подаренного лабораторией Qi-Jun Chen (Xing et al., 2014), в котором неомицинфосфотрансферазы II ( ntpII ) был заменен геном устойчивости к баста ( bar ).Кодирующая последовательность гена bar была амплифицирована из бинарного вектора pZY102 (Zeng et al., 2004) с использованием пар праймеров: Nco I- bar -F и Rsr II- bar -R (дополнительный Таблица S1). ПЦР-амплификацию проводили с использованием набора ДНК-полимеразы Phusion High-Fidelity (кат. № F553L — Thermo Scientific) в соответствии с инструкциями производителя. После очистки продукты ПЦР встраивали в pKSE401 по сайтам Nco I и Rsr II.Для вставки GRNA, BSA I- CSBHLHLH66 GRNA-GRNA Scagebold- U6 Terminator- BSA I и BSA I- U6 Promotion- CSBHLHLH82 -Grna- BSA I Фрагменты были созданы из матрицы pKSE401 с помощью ПЦР с использованием перечисленных праймеров (дополнительная таблица S1). Эти два фрагмента были собраны в целевой вектор pKSE401 с использованием ферментных сайтов Bsa I. Окончательный сконструированный вектор был подтвержден секвенированием и назван pKSE401-CsbHLH82-66.Бинарные векторы pKSE401-CsbHLH82-66 и pZY102 были мобилизованы в штамме R. rhizogenes K599 и использованы для трансформации волосатых корней огурца.

    Rhizobium rhizogenes — Опосредованная трансформация и индукция волосовидных корней

    Штаммы Rhizobium rhizogenes , включая ATCC 15834 (pRi15834) и K599 (pRi2659) дикого типа или несущие бинарные векторы, использовали для бактериально-опосредованной трансформации. Вкратце, отдельные колонии культивировали в 5 мл среды с жидким дрожжевым экстрактом и пептоном (YEP) с добавлением соответствующих антибиотиков (25 мг/л рифампицина для штамма R.штамм rhizogenes К599; отсутствие антибиотика для штамма R. rhizogenes ATCC 15834; 25 мг/л рифампицина плюс 50 мг/л канамицина штамм R. rhizogenes K599, несущий вектор pKSE401-CsbHLH82-66; 25 мг/л рифампицина плюс 100 мг/л спектиномицина для штамма R. rhizogenes K599, содержащего вектор pZY102). Культуру встряхивали при 28°С и 200 об/мин в течение 4–6 ч, переносили в 100 мл свежей среды и культивировали в течение ночи до достижения OD 650 0,8–1,0.На следующий день клетки собирали центрифугированием при 3000 об/мин в течение 15 мин и повторно суспендировали в ресуспендирующей среде (таблица 1), чтобы получить OD 650 0,4.

    Семядоли двухдневных проростков собирали и использовали в качестве эксплантатов для заражения. Дистальные части и проксимальные черешки вырезали и удаляли. Затем проксимальные части семядолей разрезали пополам по средней жилке, чтобы получить небольшие кусочки (рис. 1А, Б). Сегменты семядолей во время срезки хранили на влажной фильтровальной бумаге, чтобы избежать потери воды.Около 60–70 эксплантатов замачивали в 30 мл бактериальной суспензии на 30 мин при комнатной температуре (рис. 1С). Затем экспланты извлекали из лишней жидкости и помещали на среду для совместного культивирования (табл. 1), накрытую сверху фильтровальной бумагой (Whatman № 1001-090). Чашки с культурами выдерживали при температуре 25±2°С в темноте в течение 5 дней. Далее экспланты промывали автоклавной водой, промокали стерильной фильтровальной бумагой и помещали на среду для культивирования волосатых корней (табл. 1) на 15–20 сут. Фрагменты кончиков корней (2  см) вырезали и переносили на свежую среду для удлинения и развития.Трансгенные волосатые корни были получены на среде для селекции волосатых корней (таблица 1) в течение 10–15 дней (рис. 1Е). Индукцию и селекцию волосистых корней огурца проводили при температуре 25 ± 2°C при освещенности 2000 люкс с фотопериодом 16/8 часов.

    Рисунок 1 . Основные этапы индукции волосатого корня огурца. (А) Проростки 2-дневные; (B) Подготовка эксплантатов семядолей. Красные стрелки указывают фрагменты семядолей, используемые для бактериальной инфекции; (C) фрагментов семядолей замачивали в бактериальной суспензии; (D) инфицированные экспланты на среде для совместного культивирования; (E) образование волосовидных корней через 20  дней после совместного культивирования; (F) фрагментов волосовидных корней были перенесены на новую среду; (G) волосатые корни, развитые на культуральной среде для волосатых корней.

    GUS Гистохимический анализ

    Волосатые корни, трансформированные pZY102, выжившие в селекционной среде, были собраны для гистохимического анализа GUS с использованием 5-бром-4-хлор-3-индолилглюкуронидного буфера при 37°C в течение 16 часов (Jefferson et al., 1987). Экспрессию GUS в волосатых корнях огурца наблюдали и снимали обычной камерой.

    Идентификация и характеристика индуцированных мутантных волосатых корней

    Фенотипы корневых волосков анализировали с использованием метода, описанного Karas et al.(2005, 2009), в которых корневые волоски наблюдали под стереомикроскопом ZEISS Stemi 305 и снимали с помощью цифровой камеры AxioCam ERc 5. Геномную ДНК экстрагировали из волосатых корней методом CTAB (Doyle, Doyle, 1987). Волосатые корни с индуцированными мутациями в генах CsbHLH были обнаружены с помощью гетеродуплексного анализа на электрофорезе в полиакриламидном геле (PAGE; Chen et al., 2012) с некоторыми модификациями. Вкратце, охватывающие области-мишени на генах CsbHLH были амплифицированы с использованием фланкирующих специфических праймеров (дополнительная таблица S1).ПЦР-амплификацию проводили с использованием DreamTaq Green PCR Master Mix (кат. № K1081 – Thermo Scientific) при следующих условиях: начальная денатурация при 94°C в течение 4 мин; 30 циклов при 94°C в течение 20 с, 55°C в течение 20 с и 72°C в течение 30 с, и конечное удлинение при 72°C в течение 5 мин. Смесь, содержащую одинаковые ампликоны дикого типа (WT) и трансгенных волосовидных корней, денатурировали при 95°C в течение 10 мин и медленно охлаждали до комнатной температуры с образованием гетеродуплексов. Гетеродуплексы выявляли с помощью электрофореза в 12% полиакриламидном геле.Ампликоны ПЦР дополнительно очищали и лигировали в клонирующий вектор pJET1.2 (Thermo FisherScientific, США) для секвенирования. Секвенирование проводили на системе ABI3500XL (Applied Biosystems). Мутантные последовательности CsbHLH сравнивали с последовательностями дикого типа с использованием BioEdit 7.2.

    Статистический анализ

    Все статистические анализы проводились с использованием программного обеспечения SPSS версии 24.1. Значимый анализ (значение p  < 0,05) между экспериментами был выполнен с помощью теста Стьюдента t или однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным новым многодиапазонным тестом Дункана.

    Результаты

    Оптимизация процедуры индукции волосатых корней огурца

    В этом исследовании кусочки семядолей 2-дневных сеянцев сорта ChokaF1 сначала инокулировали штаммом R. rhizogenes K599, чтобы оценить влияние продолжительности совместного культивирования на эффективность индуцированного опушения корней. Через 3, 5 и 7 дней совместного культивирования эксплантаты переносили на среду для индукции волосатых корней. Было 21,1 ± 1,6% эксплантов после 5-дневного совместного культивирования, которые показали образование волосатых корней через 5 дней на индукционной среде, и оно резко достигло 100% через 20 дней после совместного культивирования (рис. 2А).В то время как самая высокая доля эксплантов при 3- и 7-дневном совместном культивировании, образующих волосатые корни через 20 дней, составляла 84,4 ± 1,6% и 65,6 ± 3,14% соответственно, и при продлении периода культивирования экспланты больше не давали волосистых корней. Бактериальный рост также наблюдался при 7-дневной обработке совместным культивированием (данные не показаны). Таким образом, 5-дневного совместного культивирования было достаточно для индуцирования волосатых корней у местного огурца ChokaF1 и дальнейшего использования во всех экспериментах по трансформации огурца в волосатую форму.

    Рисунок 2 .Влияние продолжительности совместного культивирования и бактериальных штаммов на индукцию волосатых корней огурца. (A) Время совместного выращивания и индукция волосистых корней. (B) Штаммы Rhizobium rhizogenes влияют на индукцию волосяных корней. Индукцию волосовидных корней наблюдали и подсчитывали в разные моменты времени. Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение для трех повторов. Для каждой обработки использовали около 30 эксплантов.

    Влияние штамма R. rhizogenes (ATCC 15834), широко используемого штамма R.rhizogenes для индуцирования опушенных корней у различных видов растений, включая огурец (Shi et al., 2006; Shi and Lindemann, 2006), также оценивали на местном сорте огурца по сравнению со штаммом K599 (рис. 2B). В этом эксперименте экспланты, инокулированные штаммом АТСС 15834, продуцировали волосатые корни раньше, чем экспланты, инфицированные штаммом К599. Около 33,3 ± 11,9% эксплантов индуцировали волосатые корни (2–3 см) через 1 неделю на среде для индукции волосистых корней, тогда как у эксплантов, инфицированных K599, не наблюдалось волосистых корней.Через 10 дней доля эксплантов, образующих волосатые корни, составила 34,4 ± 4,2% для К599, а для штамма АТСС 15834 она удвоилась (61,1 ± 18,1%). Количество эксплантов, инокулированных ATCC 15834, образующих волосатые корни, было постоянно выше, чем эксплантов, обработанных K599, через 15 дней. Однако через 20 дней самая высокая частота индукции волосовидных корней у инфицированных эксплантов ATCC 15834 была ниже (83,3 ± 16,6%), чем у K599 (100%). Кроме того, наблюдали образование каллусов на участках ран, а также на целых эксплантатах, инокулированных штаммом АТСС 15834.Принимая во внимание, что очень мало каллусов образовалось в результате инокуляции K599 (дополнительная фигура S1).

    Исходя из всех вышеприведенных результатов, была разработана оптимизированная процедура для индукции волосатых корней огурца in vitro , в которой семядоли 2-дневных проростков были инфицированы R. rhizogenes K599 и совместно культивировались в течение 5 дней. Общее время проведения процедуры составляет менее 1 месяца, а скорость индукции волосяных корней может достигать 100%. Детали процедуры представлены на рисунках 1, 3.

    Рисунок 3 . Процедура индукции волосатых корней огурца с использованием семядолей.

    Использование волосистой корневой системы огурца для проверки активности вектора трансформации растений и экспрессии трансгена

    Используя развитую волосистую корневую систему, удобно оценить экспрессию трансгенов. Штамм K599, несущий бинарный вектор pZY102, несущий репортерный ген ( gus ) и селективный ген ( bar ), переносили в кусочки семядолей огурца.Индуцированные волосатые корни (2  см) удаляли из эксплантов и культивировали на среде для селекции, содержащей гербицид фосфинотрицин (ФФТ) в концентрациях от 0,5 до 5  мг/л. Устойчивые к гербицидам волосатые корни показали нормальную морфологию и развитие, в то время как неустойчивые волосатые корни полностью ингибировались и желтели без удлинения (рис. 4А). Анализ экспрессии гена gus в предполагаемых трансгенных волосатых корнях (устойчивых к гербицидам) через 10 дней в среде для селекции показал, что не все из них были положительными в отношении окрашивания GUS (рис. 4B, C; дополнительная рис. S2).Количество селекционно-ускользающих волосовидных корней варьировало и зависело от концентрации ФФТ. На среде с 3 или 5 мг/л ПФТ уцелело 6,7 ±1,6% выживших волосовидных корней. Это число увеличилось до 46 ± 7,2% и 48,7 ± 7,6% в среде, содержащей 1,0 и 0,5 мг/л ПФТ соответственно. На 15-й день в селекционной среде с концентрацией 3 мг/л PPT количество волосатых корней, положительных/отрицательных по GUS, существенно не отличалось от количества волосатых корней на 10-й день (рис. 4C). Этот результат указывает на то, что трансгенные волосатые корни могут быть эффективно получены в среде РРТ с концентрацией 3 мг/л за 10 дней с самой низкой скоростью ускользания от селекции.Таким образом, активность бинарного вектора и экспрессию трансгенов можно эффективно анализировать с использованием волосистой корневой системы огурца in vitro в течение 10–15 дней.

    Рисунок 4 . Селекция трансгенных волосатых корней и гистохимический анализ. (A) Волосатые корни через 10 дней на среде для селекции с добавлением 3 мг/л РРТ. Красные стрелки указывают на волосатые корни, устойчивые к PPT. (B) GUS гистохимический анализ нетрансгенных (слева) и трансгенных волосяных корней (справа). (C) Влияние концентрации PPT на эффективность селекции. Уцелевшие волосатые корни относятся к устойчивым к PPT волосатым корням без окрашивания GUS. Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение для трех повторов. Разные буквы обозначают значительные различия, основанные на однофакторном анализе ANOVA с критерием Дункана ( p  < 0,05, n  = 30).

    Идентификация генов-мишеней для индуцированного CRISPR/Cas9 мутагенеза волосистого корня огурца

    В дополнение к тестированию экспрессии трансгена разработанная в этом исследовании система индукции волосяных корней применялась для исследований по редактированию генома с использованием системы CRISPR/Cas9.Четыре последовательности-кандидата, а именно CsbHLH82, CsBHLH66, CsUNE12, CsBHLH84, были идентифицированы, когда последовательность белка LjRHL1 (из Lotus japonicus , Karas et al., 2009) использовалась в качестве эталона для поиска в базе данных огурцов (NCBI: ASM407v2) с помощью белкового инструмента BLAST. Филогенетическое дерево было построено с использованием четырех последовательностей-кандидатов, последовательности LjRHL1 и 3 последовательностей-ортологов из Arabidopsis thaliana методом максимального правдоподобия и моделью на основе матрицы JTT в MEGA X (Kumar et al., 2018). Результат показал, что CsbHLH82 и CsbHLH66 были очень близки к LjRHL1 (рис. 5А). Более того, последовательности доменов bHLH CsbHLH82 и CsbHLH66 были идентичны последовательности LjRHL1 (фиг. 5B). Таким образом, как CsbHLH82 , так и CsbHLH66 были выбраны в качестве мишеней для мутагенеза в волосистых корнях огурца.

    Рисунок 5 . Филогенетическое дерево и анализ последовательности гомологов LjRHL1. (A) Молекулярно-филогенетическое дерево последовательности белка LjRHL1 и его гомологов было проведено с помощью MEGA X с использованием метода максимального правдоподобия и модели на основе матрицы JTT.Цифры в узлах указывают на процентную оценку начальной загрузки из 1000 повторов. Масштабная линейка представляет 0,2 предполагаемого количества событий аминокислотной замены на сайт. (B) Выравнивание последовательностей домена bHLH (в красной рамке) LjRHL1 в Lotus japonicus и его гомологах в огурце и арабидопсисе.

    Индуцирование целевых мутаций в волосистых корнях огурца с помощью системы CRISRP/Cas9

    Последовательности ДНК генов CsbHLH82 и CsbHLH66 были повторно подтверждены в местном сорте огурца для разработки вектора CRISPR/Cas9.Две гРНК, нацеленные на первый экзон CsbHLH66 и CsbHLH82 , были идентифицированы с использованием инструмента CCTop (рис. 6А) и вставлены в бинарный вектор экспрессии CRISPR/Cas9 (рис. 6В) с целью вызвать индивидуальные и одновременные целевые мутации два проверенных гена.

    Рисунок 6 . Конструирование CRISPR/Cas9 и фенотипирование мутантных волосяных корней. (A) Карты генов CsbHLH66 , CsbHLH82 и целевых местоположений.Черные стрелки указывают сайты связывания праймеров для генотипирования. (B) Области Т-ДНК вектора трансформации растений CRISPR/Cas9. (C) Фенотипы корневых волосков WT и мутантных волосяных корней. Красная шкала показывает 1 мм.

    Направленные мутации CsbHLH82 и CsbHLH66 были индуцированы в волосовидных корнях с использованием штамма K599, содержащего вектор CRISPR/Cas9. Каждый индуцированный волосовидный корень, рассматриваемый как самостоятельная линия, был перенесен на селекционную среду.Фенотипирование, основанное на более чем 80 линиях волосистых корней, показало, что существует три морфологических группы (рис. 6C; дополнительная фигура S3), включая (1) обильные корневые волоски, такие как волосатые корни дикого типа (22,04%), (2) редкие и короткие корневые волоски. (52,54%) и (3) голые корни (25,42%).

    Гетеродуплексный анализ 13 случайно выбранных линий волосистых корней из групп 2 и 3 (рис. 7A, B) показал, что все протестированные линии содержали мутации CsbHLH82 при наблюдении смещенной полосы ДНК на геле PAGE по сравнению с волосатыми корнями дикого типа. (Рисунок 7А).В случае CsbHLH66 только 4 линии волосовидных корней (3, 6, 10, 30) демонстрировали индуцированные мутации (фиг. 7B). Важно отметить, что все эти 4 линии принадлежали к группе 3, имеющей корневой фенотип без волосков.

    Рисунок 7 . Идентификация и характеристика индуцированных мутаций в волосистых корнях огурца. (A,B) Гетеродуплексный анализ CsbHLH82 и CsbHLH66 соответственно. M: лестница ДНК длиной 100 п.н.; WT: дикий тип. (C,D) Расширение целевых последовательностей генов CsbHLH82 и CsbHLH66 .Красные буквы обозначают целевые последовательности. Синие буквы относятся к последовательностям PAM. Зеленые буквы обозначают вставленные нуклеотиды. Отступы указывают на целевые изменения последовательности: 0 для отсутствия изменений, − для удаления, + для вставки. Указано количество клонов, использованных для секвенирования.

    Индуцированные мутации в генах CsbHLH 3 линий (4, 15, 29) из группы с запасными корневыми волосками и 4 линий (2, 6, 9, 10) из группы без корневых волосков были дополнительно охарактеризованы через секвенирование целевых ампликонов (рис. 7C, D).Для гена CsbHLH82 индуцированные мутации произошли во всех протестированных линиях волосистых корней (рис. 7C). В местах-мишенях наблюдались различные типы инделей, в которых размеры делеций варьировались от -1  п.н. до -33  п.н., а вставки были от +1 до +10  п.н. В отличие от CsbHLH82 , целевые мутации в CsbHLH66 были подтверждены только в 5 из 7 проверенных линий корневых волосков, включая 2 мутантных аллеля в линиях 2 и 15, которые не обнаруживались при гетеродуплексном анализе из-за инделей только в 1 п.н. или удаление).Вставка в 1 п.н. и большие делеции (от -16 до -49 п.н.) в гене-мишени CsbHLH66 были обнаружены в 3 протестированных безволосых корневых линиях, в то время как делеция в 1 п.н. была обнаружена только в одной линии с редкими корневыми волосками 15 (рис. 7D). ). Более того, два мутантных аллеля (биаллельная мутация) генов-мишеней также наблюдались во многих линиях волосистых корней, таких как линии 6 и 10 гена CsbHLH66 и линии 2, 6, 15 и 29 гена CsbHLH82 (рис. 7C, Д). В линии 9 обнаружен гомозиготный мутантный аллель (по гену CsbHLH82 ).Три различных аллеля (химерные аллели) гена CsbHLH82 также наблюдались в линии 4 волосистых корней. Важно отметить, что линии 6 и 10 содержали нулевые мутации обоих генов CsbHLH82 и CsbHLH66 . Как следствие, очевидно, что разработанная нами мохнатая корневая система имеет большой потенциал для исследований по редактированию генома огурцов.

    Стабильность индуцированных мутаций генов-мишеней была дополнительно подтверждена в размноженных in vitro волосовидных корнях.Фрагменты корней линий 6 и 10 вырезали и размножали в новой среде для следующих поколений. Анализ секвенирования гетеродуплекса, Сэнгера и ампликона проводили с использованием ДНК, выделенной из корневых линий третьего размножения. Образцы полос ДНК в PAGE и данные секвенирования показали, что мутации, наблюдаемые в размноженных линиях, были такими же, как и в первичных корнях (первое размножение) как для CsbHLH82 , так и для CsbHLH66 (дополнительная фигура S4). Этот результат показал, что стабильно индуцированные мутации были проведены в волосистых корнях огурца.

    Обсуждение

    Создание эффективной процедуры для огурцов

    in vitro Индукция волосистых корней

    В этом исследовании была разработана эффективная процедура индукции волосатого корня огурца in vitro . Частота индукции волосовидных корней могла достигать 100% через 20 дней совместного культивирования с использованием штамма R. rhizogenes K599. Сообщалось, что различные факторы, включая экспланты, совместную инокуляцию и условия совместного культивирования, влияют на эффективность трансформации растений, а также на индукцию волосатых корней.В наших результатах 5-дневное совместное культивирование было выбрано из-за самой высокой эффективности индукции волосяных корней. Продолжительность сокультивирования, увеличенная до 7 дней, отрицательно повлияла на образование волосистых корней огурца из-за избыточного роста бактерий после инокуляции. Этот результат согласуется с Shi et al. (2006), в которых 5 дней совместного культивирования считались оптимальными для индуцирования in vitro волосатых корней огурца . Еще одной оптимизацией в этом исследовании было использование кусочков семядолей 2-дневных проростков в качестве исходных эксплантов вместо 10-дневных проростков, как в предыдущих исследованиях (Shi et al., 2006; Shi and Lindemann, 2006) для формирования волосовидных корней. Сообщалось, что такие экспланты оптимальны только для трансформации и регенерации огурцов (Nanasato et al., 2013). Помимо увеличения количества продуцируемых корней волос, использование более молодых семядолей также помогает сократить время, необходимое для процедуры индукции волосяных корней (<1 месяца).

    Rhizobium rhizogenes Штамм K599 эффективен для индукции волосатых корней огурца

    Волосатые корни были эффективно индуцированы у местного сорта Чока F1 с использованием R.rhizogenes штамм К599. Бактериальные штаммы известны как важный фактор индукции и трансформации волосяных корней. В предыдущих исследованиях различные штаммы R. rhizogenes использовались для индукции in vitro волосовидных корней у огурца (Trulson et al., 1986; Shi et al., 2006; Shi and Lindemann, 2006; Anuar et al., 2011). ; JingLong et al., 2017), а скорость индукции волосовидных корней варьировала в зависимости от сорта огурца и процедуры трансформации. Ши и соавт. сообщили о частоте индукции волосяных корней более 90%.(2006) и Ши и Линдеманн (2006) с использованием штамма ATCC 15834. Недавно штамм R. rhizogenes K599 был использован для индуцирования волосатых корней у огурцов с частотой 95% в условиях in vivo (Fan et al., 2020). В нашем исследовании штамм K599 мог способствовать образованию сильных опушенных корней у 100% инфицированных эксплантов огурца, что намного выше, чем у штамма ATCC 15834 (83,3 ± 16,6%). Образование мозолей вместо волосистых корней штаммом ATCC 15834 (дополнительная фигура S1) может быть причиной снижения количества образующихся волосяных корней.Меньшее количество каллюсов, образованных при инокуляции K599, сочеталось с лучшей морфологией волосистых корней. Таким образом, штамм К599 наиболее подходит для индукции образования волосовидных корней и трансформации местного сорта.

    Удобный инструмент для оценки активности конструкций CRISPR/Cas9 в огурцах

    Волосатые корневые системы использовались для редактирования генома различных видов растений. Для огурца волосистая корневая система применялась для изучения поколения трансгенных растений (Trulson et al., 1986), экспрессии генов (Fan et al., 2020), оценке промотора (Anuar et al., 2011), продукции рекомбинантных белков (Shi and Lindemann, 2006), но пока не для редактирования генома. В этом исследовании эффективная процедура in vitro индукции волосатых корней местного сорта огурца (ChokaF1), которая была успешно использована для стабильной трансформации (Hoang et al., 2021). Эта процедура была хорошо выполнена для экспрессии репортерного гена ( gus ) за короткое время. Развитая мохнатая корневая система также была эффективна для редактирования генов огурца с использованием конструкции CRISPR/Cas9.Направленные мутации двух эндогенных генов ( CsbHLH66 и CsbHLH82 ) были точно индуцированы. В протестированных корнях волос наблюдались различные вставки генов-мишеней, включая вставки, а также большие и малые делеции (рис. 7). Все гомозиготные, гетерозиготные и биаллельные, а также химерные аллели могут быть получены в первичных волосатых корнях (рис. 7). Кроме того, способность к нацеливанию различных sgRNAs (единственная направляющая РНК) может быть оценена в течение 1 месяца, а при использовании подхода с трансгенными растениями — через несколько месяцев или дольше.Целевые мутации, индуцированные в трансгенных волосатых корнях, также наблюдались в стабильных трансгенных огурцах (Chandrasekaran et al., 2016; Hu et al., 2017).

    CsbHLH66 и CsbHLH82 Гены участвуют в формировании корневых волосков огурца

    Фенотип без волосков на корнях наблюдался у Lotus japonicus и был охарактеризован как следствие естественных мутаций в гене SjRHL1 (Karas et al., 2009). У A. thaliana этот фенотип был также обнаружен у тройного мутанта AtLRL1 , AtLRL2 и AtLRL3 , в то время как редкие фенотипы корневых волосков были вызваны одиночными или двойными мутациями этих трех генов (Karas et al. ., 2009). В нашем исследовании индуцированные мутации в CsbHLH82 приводили к фенотипу запасных корневых волосков (линии 15, 29), в то время как одновременные мутации генов CsbHLH82 и CsbHLH66 вызывали фенотип без корневых волосков (линии 6, 10; Фигуры 7С,D). Этот результат предполагает, что два фактора транскрипции bHLH, кодируемые CsbHLH82 и CsbHLH66 , избыточно участвуют в регуляции образования корневых волосков у огурца. Однако необходимо провести дальнейшие исследования, чтобы охарактеризовать и подтвердить вклад генов CsbHLH66 , CsbHLH82 и других CsbHLH в образование корневых волосков огурца на уровне всего растения.

    Заключение

    В этом исследовании для местного сорта огурца был разработан эффективный протокол индукции и трансформации волосовидных корней огурца. Эта мохнатая корневая система была успешно использована для оценки экспрессии трансгенов и активности систем CRISPR/Cas9 в течение 1 месяца. Полученный результат, очевидно, представляет собой потенциальный инструмент для исследований экспрессии трансгенов и редактирования генома у огурца, а также других растений Cucumis .

    Заявление о доступности данных

    Оригинальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью/дополнительный материал, дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.

    Вклад авторов

    PD и HC разработали и руководили исследованием. PD, DN и TH разработали эксперименты, проанализировали данные и подготовили рукопись. CN провела филогенетическое дерево и разработала гРНК. NL и HT выполняли конструирование векторов CRISPR/Cas9. TH провел трансформацию волосатого корня огурца. DN провел генотипирование и фенотипирование трансгенных волосяных корней. HC, Y-HM и CN отредактировали и вычитали рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

    Финансирование

    Это исследование было поддержано Национальным фондом науки и технологий Вьетнама (106.03-2019.11) и Вьетнамской академией науки и технологий (ĐLTE00.10/20-21).

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Примечание издателя

    Все претензии, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций или издателя, редакторов и рецензентов.Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

    Благодарности

    Авторы благодарят Van Tuong Nguyen за корректуру рукописи и полезные советы.

    Дополнительный материал

    Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2021.770062/full#supplementary-material

    .

    Дополнительная таблица S1 | Праймеры, используемые в этом исследовании.

    Дополнительный рисунок S1 | Индукция волосистых корней огурца штаммом Rhizobium rhizogenes K599 и ATCC 15834. Фотографии сделаны через 10 дней после совместного культивирования.

    Дополнительный рисунок S2 | GUS гистохимический анализ волосистых корней, устойчивых к гербицидам. WT: нетрансгенные волосатые корни, выращенные на среде без РРТ; 1–14: Волосатые корневые линии выжили и развились на селекционной среде с РРТ.

    Дополнительный рисунок S3 | Распределение фенотипов корневых волосков протестированных корневых волосков огурца.

    Дополнительный рисунок S4 | Стабильность индуцированных мутаций в размножаемых волосовидных корнях огурца. (А) Гетеродуплексный анализ гена CsbHLH66 . (B) Гетеродуплексный анализ гена CsbHLH82 . M: лестница ДНК длиной 100 п.н.; WT: дикий тип; P6 и P10: исходные волосатые корни линий 6 и 10; 6-1, 6-1-1, 10-1, 10-1-1: Размноженные корни из линий 6 и 10 во втором и третьем поколениях. (C, D) Расширение целевых последовательностей генов CsbHLH82 и CsbHLH66 из размноженных корней линий волосатых корней 6 и 10.Секвенирование ампликонов проводили по методу Сэнгера. Ожидаемые последовательности мутантных аллелей были обозначены верхними хроматограммами. (E) Секвенирование клонов CsbHLH82 и CsbHLH66 целевых областей размноженных волосистых корней огурца в третьем поколении. Красные и синие буквы обозначают целевую последовательность и последовательность PAM соответственно. Зеленые буквы обозначают вставленные нуклеотиды.

    Каталожные номера

    Ануар, М., Исмаил, И., и Зайнал, З. (2011). Анализ экспрессии промотора 35S CaMV и его производных в трансгенных культурах волосатых корней огурца ( Cucumis sativus ), полученных в результате инфекции Agrobacterium rhizogenes . фр. Дж. Биотехнология. 10, 8236–8244. дои: 10.5897/AJB11.130

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Буэно-дос-Рейс, Л., Лемеш да Силва, М., Барселуш Пассос Лима, А., Пейшоту де Оливейра, М.Л., Лопес Паим Пинту, Д., Рибейро Гарсия Лани, Э., и др. (2007). Опосредованная Agrobacterium rhizogenes трансформация видов маракуйи: Passiflora cincinnata и P. edulis f. флавикарпа. Акта Хортик. 738, 425–431. doi: 10.17660/ActaHortic.2007.738.51

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Батлер, Н. М., Янски, С. Х., и Цзян, Дж. (2020). Редактирование генома первого поколения у картофеля с использованием трансформации волосяных корней. Завод Биотехнолог. J. 18, 2201–2209. doi: 10.1111/pbi.13376

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Чандрасекаран, Дж., Брумин, М., Вольф, Д., Лейбман, Д., Клап, С., Перлсман, М., и соавт. (2016). Развитие широкой устойчивости к вирусам у нетрансгенных огурцов с использованием технологии CRISPR/Cas9. Мол. Завод Патол. 17, 1140–1153. doi: 10.1111/mpp.12375

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Чи, П. П. (2001). «Трансгенный огурец ( Cucumis sativus L.)», в Transgenic Crops II. изд. YPS Bajaj (Берлин, Гейдельберг: Springer Berlin Heidelberg), 132–146.

    Академия Google

    Чен, Дж., Чжан, X., Ван, Т., Ли, З., Гуань, Г., и Хун, Ю. (2012). Эффективное обнаружение, количественная оценка и обогащение тонких аллельных изменений. Рез. ДНК. 19, 423–433. doi: 10.1093/dnares/dss023

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Хояк-Козневская, Дж., Кузняк, Э., и Зимный, Дж. (2018). Влияние комбинированного абиотического и патогенного стресса на растения: выводы Из засоления и взаимодействия Pseudomonas syringae pv lachrymans в огурце. Перед. Растениевод. 9:1691. doi: 10.3389/fpls.2018.01691

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Дойл, Дж.Дж. и Дойл, Дж. Л. (1987). Процедура быстрого выделения ДНК для небольшого количества свежей ткани листа. Фитохим. Бык. 19, 11–15.

    Академия Google

    Du, H., Zeng, X., Zhao, M., Cui, X., Wang, Q., Yang, H., et al. (2016). Эффективный направленный мутагенез в сое с помощью TALEN и CRISPR/Cas9. Дж. Биотехнология. 217, 90–97. doi: 10.1016/j.jbiotec.2015.11.005

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Элшири, Н.I., Helaly, M.N., Omar, S.A., John, S.V.S., Zabochnicka-Swiątek, M., Kalaji, H.M., et al. (2020). Физиологические и молекулярные механизмы солеустойчивости привитого огурца. Южная Африка Дж. Бот. 130, 90–102. doi: 10.1016/j.sajb.2019.12.014

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Фань Ю., Сюй Ф., Чжоу Х., Лю Х., Ян Х., Венг К. и др. (2020). Быстрое, простое, высокоэффективное и одностадийное создание составных растений огурца с трансгенными корнями путем трансформации, опосредованной Agrobacterium rhizogenes . Культ органов растительных клеток. 141, 207–216. doi: 10.1007/s11240-020-01781-x

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Гутьеррес-Вальдес, Н., Хаккинен, С.Т., Лемассон, К., Гийе, М., Оксман-Калдентей, К.-М., Ритала, А., и др. (2020). Культуры волосистых корней — универсальный инструмент с множеством применений. Перед. Растениевод. 11:33. doi: 10.3389/fpls.2020.00033

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Хоанг, Т. Х.T., Hoang, L.K., Nguyen, L.T., Trinh, D.D., Le, T.N.T., Pham, N.B., et al. (2021). Исследование in vitro систем регенерации и трансформации огурца сорта Чока F1 с использованием репортерного гена gus . ТНУ J. Sci. Технол. 226, 83–91. (вьетнамский с аннотацией на английском языке)

    Академия Google

    Hu, B., Li, D., Liu, X., Qi, J., Gao, D., Zhao, S., et al. (2017). Создание нетрансгенного гинекологического огурца с использованием улучшенного протокола трансформации и оптимизированной системы CRISPR/Cas9. Мол. Завод 10, 1575–1578 гг. doi: 10.1016/j.molp.2017.09.005

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Джейкобс, Т. Б., и Мартин, Г. Б. (2016). Создание высокопроизводительного вектора CRISPR и характеристика модификаций ДНК путем образования волосатых корней томата. Дж. Виз. Эксп. 110:53843. дои: 10.3791/53843

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Джефферсон, Р. А., Кавана, Т. А., и Беван, М. В. (1987).Слияния GUS: бета-глюкуронидаза в качестве чувствительного и универсального маркера слияния генов у высших растений. EMBO J. 6, 3901–3907. doi: 10.1002/j.1460-2075.1987.tb02730.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    JingLong, J., Chao, J., Li, L., JiXue, S., Yun, T., and XuMing, R. (2017). Исследования влияния различных условий на скорость индукции волосовидных корней у Cucumis sativus L. J. Agric. науч. Технол. 19, 24–30.doi: 10.13304/j.nykjdb.2016.581

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Карас Б., Амиот Л., Йохансен К., Сато С., Табата С., Кавагути М. и др. (2009). Сохранение белков лотоса и основных белков спираль-петля-спираль Arabidopsis выявляет новых игроков в развитии корневых волосков. Завод физиол. 151, 1175–1185. doi: 10.1104/стр.109.143867

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Карас Б., Мюррей Дж., Горзелак М., Smith, A., Sato, S., Tabata, S., et al. (2005). Инвазия Lotus japonicus безволосого корня 1 Mesorhizobium loti включает зависимую от фактора нодуляции индукцию корневых волосков. Завод физиол. 137, 1331–1344. doi: 10.1104/стр.104.057513

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Кумар С., Стечер Г., Ли М., Князь К. и Тамура К. (2018). MEGA X: молекулярно-эволюционный генетический анализ на вычислительных платформах. Мол. биол. Эвол. 35, 1547–1549. doi: 10.1093/molbev/msy096

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ле, Х., Нгуен, Н. Х., Та, Д. Т., Ле, Т. Н. Т., Буй, Т. П., Ле, Н. Т., и др. (2020). Опосредованный CRISPR/Cas9 нокаут генов, кодирующих галактинолсинтазу , снижает уровни олигосахаридов семейства раффиноз в семенах сои. Перед. Растениевод. 11:612942. doi: 10.3389/fpls.2020.612942

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ли, К., Nguyen, V., Liu, J., Fu, W., Chen, C., Yu, K., et al. (2019). Мутагенез генов запасных белков семян сои с использованием CRISPR/Cas9. BMC рез. Примечания 12:176. doi: 10.1186/s13104-019-4207-2

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Лю Л., Дуань Л., Чжан Дж., Ми Г., Чжан X., Чжан З. и др. (2013). Ген Arabidopsis LOS5 повышает устойчивость огурцов к холоду и солевому стрессу. Дж. Интегр. Агр. 12, 825–834. дои: 10.1016/С2095-3119(13)60270-1

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Михно, Дж.-М., Ван, X., Лю, Дж., Куртин, С.Дж., Коно, Т.Дж., и Ступар, Р.М. (2015). Мутагенез CRISPR/Cas сои и Medicago truncatula с использованием нового веб-инструмента и модифицированного фермента Cas9. GM Crops Food 6, 243–252. дои: 10.1080/21645698.2015.1106063

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Мурасиге Т. и Скуг Ф. (1962). Обновленная среда для быстрого роста и биоанализа с культурами тканей табака. Физиол. Растение. 15, 473–497. doi: 10.1111/j.1399-3054.1962.tb08052.x

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Нанасато Ю., Конагая К.-И., Окузаки А., Цуда М. и Табей Ю. (2013). Улучшение опосредованной Agrobacterium трансформации огурца ( Cucumis sativus L.) путем сочетания вакуумной инфильтрации и совместного культивирования на фильтровальной бумаге. Завод Биотехнолог. 7, 267–276. doi: 10.1007/s11816-012-0260-1

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Париж, Х.С., Даунай, М.-К., и Яник, Дж. (2012). Западное распространение огурца ( Cucumis sativus ) 500–1300 гг. Н. Э.: два пути в Европу. Энн. Бот. 109, 117–126. doi: 10.1093/aob/mcr281

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Пладер В., Бурза В. и Малепши С. (2007). «Огурец» в Transgenic Crops IV. ред. Э.-К. Пуа и М. Р. Дэйви (Берлин, Гейдельберг: Springer Berlin Heidelberg), 181–199.

    Академия Google

    Ши, Х.-П., и Линдеманн, П. (2006). Экспрессия рекомбинантного EHRH Digitalis lanata. Карденолид 16′-O-глюкогидролаза в Cucumis sativus L. волосатые корни. Plant Cell Rep. 25, 1193–1198. doi: 10.1007/s00299-006-0183-9

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ши, Х.-П., Ци, Ю., Чжан, Ю., и Лян, С. (2006). Индукция волосистых корней огурца и влияние цитокинина 6-ВА на его рост и морфологию. Шэн Ву Гонг Ченг Сюэ Бао 22, 514–520.

    Реферат PubMed | Академия Google

    Стеммер, М., Тамбергер, Т., Дель Сол Кейер, М., Виттбродт, Дж., и Матео, Дж. Л. (2015). CCTop: интуитивно понятный, гибкий и надежный инструмент прогнозирования целей CRISPR/Cas9. PLoS One 10:e0124633. doi: 10.1371/journal.pone.0124633

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Таха, Н., Абдалла, Н., Байуми, Ю., и Эль-Рамади, Х. (2020). Управление производством огурцов в теплицах в засушливых условиях: обзор. Окружающая среда. Биодайверы. Защита почвы. 4. doi: 10.21608/JENVBS.2020.30729.1097

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Трулсон, А.Дж., Симпсон, Р.Б., и Шахин, Э.А. (1986). Трансформация растений огурца ( Cucumis sativus L.) с помощью Agrobacterium rhizogenes . Теор. заявл. Жене. 73, 11–15. дои: 10.1007/BF00273711

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Син, Х.-Л., Донг, Л., Ван, З.-P., Zhang, H.-Y., Han, C.-Y., Liu, B., et al. (2014). Набор инструментов CRISPR/Cas9 для мультиплексного редактирования генома растений. BMC Растение Биол. 14:327. doi: 10.1186/s12870-014-0327-y

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Зенг П., Ваднайс Д. А., Чжан З. и Полакко Дж. К. (2004). Селекция очищенного глюфосината в Agrobacterium -опосредованной трансформации сои [ Glycine max (L.) Merrill]. Plant Cell Rep. 22, 478–482.doi: 10.1007/s00299-003-0712-8

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Zhang, H., Cao, Y., Zhang, H., Xu, Y., Zhou, C., Liu, W., et al. (2020). Эффективное создание CRISPR/Cas9-опосредованных гомозиготных/биаллельных мутантов Medicago truncatula с использованием опушенной корневой системы.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.